dosage des proteines seriques par la methode du biuret - Lyon

BACCALAUREAT TECHNOLOGIQUE - SESSION 1999
SCIENCES ET TECHNOLOGIES DE LABORATOIRE
SPECIALITE : BIOCHIMIE - GENIE BIOLOGIQUE
Epreuve de Technologies Biochimiques et Biologiques
Interrogation préliminaire de BIOCHIMIE Durée : 30 minutes Coefficient : 1,5 SUJET N° 15 Calculatrice autorisée DOSAGE DES PROTEINES SERIQUES PAR LA METHODE DU BIURET A l'aide de l'annexe 1, donner le principe du dosage colorimétrique des
protéines par la méthode du Biuret. Indiquer la loi de Beer-Lambert.
Préciser la signification des différentes grandeurs et leurs unités. A l'aide des spectres d'absorption de l'annexe 2, déterminer la longueur
d'onde à laquelle s'effectue le dosage. Justifier. On prépare 50 mL d'une solution mère de sérum albumine (SAB) à 10 g/L.
Déterminer la masse de SAB à peser. A l'aide de cette solution mère, on prépare 3 solutions filles de la façon
suivante : | |F1 |F2 |F3 |
|Solution mère |2,5 |5,0 |7,5 |
|(mL) | | | |
|Solution de |7,5 |5,0 |2,5 |
|chlorure de | | | |
|sodium (mL) | | | | 5-1 Proposer le matériel utilisé pour ces dilutions. 5-2 Déterminer les concentrations massiques (en g/L) des solutions
filles.
Expliquer le calcul sur un exemple. Sachant que la concentration normale en protéines sériques est de l'ordre
de 70 g/L, quelle dilution doit-on réaliser pour ce dosage ? Justifier.
Annnexe 1. Réactif de Gornall CuSO4, 5 H2O 1,5 g
NaOH en pastilles 60 g
KI 1 g
Tartrate double de sodium et potassium 6 g
q.s.p. 1L La courbe 1 correspond au spectre d'absorption du témoin réactif.
La courbe 2 correspond au spectre d'absorption du tube dosage.
BAREME IP BIOCHIMIE sujet N°15/1999 Question Corrigé Barême
1. 1 En milieu alcalin,
il y a formation d'un complexe
5 pts
entre les liaisons peptidiques et les ions Cu2+ ;
il y a proportionnalité entre la concentration
en protéines et l'intensité de l coloration. 2 A = ?.l.C 1 pt
unités + signification des termes 4 points 3 ? = 540 - 550 nm 2 points
??max entre l'essai et le témoin 4 0,500 g 1 point fioles de 10 mL (ou tubes à essais)
pipettes automatiques, graduées ou burettes 3 points 5.2. F1 = 2,5 g/L 2 points
F2 = 5 g/L
F3 = 7,5 g/L 6 dilution au 1/10 ou au 1/20 2 points