Fiche 1

[pic] TERMINALE S
FICHE PROFESSEUR


Discipline(s) impliquée(s) SVT

Corps humain et sante/immunité adaptative /mise en évidence expérimentale
de la spécificité AG/AC

Compétence(s) travaillée (s) Communiquer en utilisant des langages et des
outils pertinents



Activité SOUTIEN

Objectifs de la séquence:
Remobiliser les mécanismes de la liaison Ag / Ac dans le cadre d'une
démarche expérimentale


Descriptif de l'activité : A partir d'un protocole expérimental (Test Elisa
différent de celui proposé en TP si déjà fait)
Schématiser des associations moléculaires de différents puits

Trois niveaux de difficultés en fonction du nombre de cas envisagés et de
la précision de consignes.

+ exercice d'application (Test de grossesse)

Durée : 1h

Modalités de validation du travail réalisé : Correction des schémas attendu
par présentation orale du groupe 3


Activite APPROFONDISSEMENt

Objectifs de la séquence:
Expliquer la diversité de la partie variable des AC



Descriptif de l'activité : Exercice de type II 2 (par groupe)

A partir de l'étude des documents ci-dessous et de vos connaissances,
identifier les mécanismes qui permettent au système immunitaire de répondre
potentiellement à une multitude de molécules.

Durée : 30 min

Modalités de validation du travail réalisé : Trace écrite lu par le prof

Activite ENTRAINEMENT ORAL

Objectifs de la séquence:
mécanismes de liaison AG/AC

Descriptif de l'activité : Présentation orale grâce à des schémas des
résultats du test Elisa

Réponse à la problématique

Durée : 20 min

Modalités de validation du travail réalisé : Discussion entre les groupes
si désaccord sur les schémas présentés.



[pic] TERMINALE S
FICHE ELEVE

1. Nature de l'activité : SOUTIEN/ ORAL

Discipline(s) impliquée(s) SVT


Corps humain et sante/immunité adaptative /mise en évidence expérimentale
de la spécificité AG/AC

Compétence(s) travaillée (s) : Communiquer en utilisant des langages et des
outils pertinents
Descriptif de la séance : démarche expérimentale ECE
Lien avec le cours traditionnel, l'épreuve au baccalauréat
Travail individuel
Durée : 30 min
Remarque : les différentes activités correspondent soit aux étapes
successives lesquelles ont été décomposées pour guider les élèves (niveau 1
et 2), soit à des approches complémentaires permettant de s'assurer que le
mécanisme ou la notion est maîtrisée (niveau 3).

ACTIVITE 1 : Schématisation des associations moléculaires dans le test
Elisa

Support documentaire (voir fiche ci dessous)

Questions : Niveau difficulté 1 :
Schématiser les associations moléculaires des puits contenant la solution
de BLG (témoin positif) et d'eau distillée (témoin négatif) avant l'étape1
et après chaque étape.
Représentation de l'antigène doit être ajoutée (forme triangulaire et
carré)
Questions : Niveau difficulté 2 :
A partir des résultats fournis,
Schématiser les associations moléculaires présentes dans les 4 puits en
fin d'expérience, et interprétez-les
A retenir : Chaque AC possède une partie variable spécifique et
complémentaire d'un AG donné.



ACTIVITE 2 : Schématisation des associations moléculaires dans le test
Elisa


Support documentaire (voir fiche ci dessous)

Questions : Niveau difficulté 3 :
Présenter oralement, grâce à des schémas, une explication aux résultats
attendus
Répondre à la problématique.


Application : Exercice sur le test de grossesse.

A retenir : Chaque AC possède une partie variable spécifique et
complémentaire d'un AG donné.















Documents pour les élèves :
Mise en situation et recherche à mener
L'ingestion par l'Homme d'une protéine, la ?-lactoglobuline bovine (BLG),
peut être responsable d'allergies (c'est-à-dire une réponse immunitaire
excessive). Pour les personnes allergiques, il peut être recommandé de
remplacer le lait de vache par du lait de soja.

La détection de la ?-lactoglobuline bovine dans les produits alimentaires
peut être réalisée par un test immunologique type ELISA.

On cherche à comprendre l'intérêt de l'utilisation de lait de soja chez les
personnes allergiques à la BLG.

Cette situation doit être différente de celle déjà vue en classe (ex
SIDA....)

Ressources de l'élève

Principe du test de détection d'antigène (type ELISA)

Les molécules antigéniques peuvent posséder plusieurs déterminants
antigéniques (ou épitope) susceptibles d'être reconnus par des anticorps
différents. C'est le cas de la ?-lactoglobuline bovine qui peut être
reconnue par les anticorps 1 et 2 :

. L'anticorps 1 (AC1) est fixé au fond d'une barrette d'identification
L'anticorps 2 (AC2) est un anticorps de détection : AC2 est associé à une
enzyme (l'acétylcholinestérase) capable de réagir avec un substrat incolore
et de donner un produit coloré
Si une solution contient de la ?-lactoglobuline bovine, celle-ci sera
maintenue au fond du puits par AC1 tout en fixant AC2 complexée à
l'acétylcholinestérase. L'ajout du substrat de l'enzyme révélera la
présence de l'AC2 et, indirectement, la présence de l'antigène.

Matériel mis à disposition :

. - Une barrette de puits au fond desquels sont fixés des
anticorps Ac1 anti ?-lactoglobuline bovine (anti BLG)
. - Une solution d'anticorps de détection = complexe entre un deuxième
anticorps anti ?-lg (Ac2) et une enzyme (l'acétylcholinestérase) = Ac2
. - Une solution de réactif d'Ellman (cette solution contient le
substrat de l'acétylcholinestérase)
. - 6 pipettes différentes, une solution de lavage avec une pipette,
des gants, un chronomètre, du papier filtre, un marqueur?
. - Quatre « solutions » à tester (les produits ont été dilués dans de
l'eau distillée) :
Une solution de ?-lactoglobuline bovine (BLG à 20ng.mL-1) = BLG
Une « solution » de lait cru de vache = V
Une « solution » de lait de soja = S
Eau distillée = E
Représentation schématique à utiliser pour le schéma explicatif à l'échelle
moléculaire

[pic] [pic] [pic]

Rem : Toutes les molécules n'ont pas été représentées







PROTOCOLE

A ce stade vous considérez que vous avez déjà organisé votre plan de
travail pour manipuler proprement et en respectant les consignes de
sécurité et que vous avez repéré les puits


Repérer les puits et déposer dans chacun d'eux 2 gouttes ou 100 ?L d'une
des solutions à tester. Attention, une solution différente par puits.
Ajouter dans chacun des puits 2 gouttes ou 100 ?L de la solution
d'anticorps de détection = AC2 (associé à l'acétylcholinestérase).
Laisser incuber 10 min à température ambiante.
Procéder au lavage:?
vider le contenu de la barrette en la retournant d'un seul mouvement au
dessus de l'évier de manière à éviter le mélange des produits
absorber le liquide restant en tapotant la barrette sur du papier filtre ;
laver les puits délicatement : remplir tous les puits aux trois-quarts avec
la solution de lavage et vider immédiatement comme précédemment ;
renouveler ce lavage deux fois (trois lavages en tout).
Ajouter dans chaque puits 4 gouttes ou 200?L de réactif d'Ellman
(substrat de l'enzyme acétylcholinestérase).
Laisser agir 7 minutes avant de lire les résultats.

Niveau difficulté 1 :
Schématiser les associations moléculaires des puits contenant la solution
de BLG (témoin positif) et d'eau distillée (témoin négatif) avant l'étape1
et après chaque étape.
Représentation de l'antigène doit être ajoutée (forme triangulaire et
carré)
Niveau difficulté 2 :
A partir des résultats fournis,
Schématiser les associations moléculaires présentes dans les 4 puits en fin
d'expérience, et interprétez-les.


Niveau difficulté 3 :
Présenter oralement, grâce à des schémas, une explication aux résultats
attendus
Répondre à la problématique.


Application : Exercice sur le test de grossesse.
















[pic] TERMINALE S
FICHE ELEVE

2. Nature de l'activité : APPROFONDISSEMENT

Discipline(s) impliquée(s) SVT


Corps humain et sante/immunité adaptative /Approche des mécanismes a
l'origine de la diversité des anticorps

Compétence(s) travaillée (s) : raisonner
Descriptif de la séance : Exercice type II.1
Lien avec le cours traditionnel, l'épreuve au baccalauréat
Travail en binôme
Durée : 30 min
Remarque : Les aides 1 et 2 ne sont distribuées que au besoin des élèves.

ACTIVITE 3 :Recherche des mécanismes à l'origine de la diversité des
anticorps

Questions :A partir de l'étude des documents ci-dessous et de vos
connaissances, identifier les mécanismes qui permettent au système
immunitaire de répondre potentiellement à une multitude de molécules.

Support documentaire (voir fiche ci contre)





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